精子形态(800字)

来源:m.ttfanwen.com时间:2017.6.29

广 东 省 湛 江 久 和 医 院 生 殖 中 心

精子形态分析报告

姓名:郭志诚 年龄: 35 岁 门诊号:1400256B 标本号:2014031104 送检医生:黄波涛 取精日期:2014-03-11 取精方式:手淫 禁欲天数:7 天 : 09 : 40 标本接受时间: 09 : 40 标本接受者:谭玉秋 报告时间: 17 : 30

形 态 分 析 结 果

分析精子总数(个) 200

正常参考值 正常精子数 (个) 5 正常精子百分比 2.5% ≥4% (WHO第5版) 异常精子数 (个) 195 异常精子百分比 97.5%

头部缺陷精子数 (个) 180 头部缺陷精子百分比 90.0%

中段缺陷精子数 (个) 53 中段缺陷精子百分比 26.5%

主段缺陷精子数 (个) 48 主段缺陷精子百分比 24.0%

过多残留胞浆精子(个) 0 过多残留胞浆精子百分比 0.0%

畸形精子指数(TZI) 1.44 ≤ 1.6 (WHO第5版)

精子畸形指数(SDI) 1.41 ≤ 1.6 (WHO第5版)

说明:按WHO要求,如一条精子同时有头、中段、主段缺陷及过多残留胞浆,四种缺陷分别被记录在相应的分类中,而这条精子只作为一个细胞被计数,所以四种缺陷数的百分率总和有可能大于100%。

注: 本结果仅对该标本负责,结果供临床参考。

报告日期:2014-03-11 阅片: 审核:


第二篇:精子形态3 24800字

2.13精子形态学分析

精子形态分析包括以下步骤(

在后面的章节有详细描述)。

1.准备一张精液涂片(见第2.13.2)。

2.空气干燥,固定和染色玻片(见第2.14章)。

3.、如果要长期保存,则加上盖玻片。(见

第2.14.2.4和2.14.2.5)。

4.把玻片置于明场光学显微镜下,100倍油镜镜检。

浸泡(见第2.15和2.16)。

精子形态3

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? 上一句

下一句 ?

正常形式(见2.15.1节)或正常(见异常形式

第2.15.2)。

6.比较对照样本结果,确定其是否在可接受范围内,如果是,则继续进行计数。如果不在范围内,则重复计数样本。 如果是这样,此案

与计算,如果没有,重新阅读的幻灯片。

2.13.1正常形态精子的概念

人类精子形态的易变性使评估变得困难,但是通过对正常男性生殖器官重新获得的精子的观察,特别是通过在性交后宫颈粘液内和透明带表面的精子

帮助确定了有潜在受孕能力的精子(形态正常)的形态。

施肥( 阮文黎 形态 正常)精子。通过严格的应用某些精子形态的标准

与正常形态精子百分率和各种生育的终点(即将怀孕TTP)的关系,怀孕率已经被建立起来, 这个也许预知生殖能力有帮助。

该分类制度的基本理论描述的是要限制

并确定宫颈粘液内定义为正常的精子,具有有潜在的受孕能力的精子分类群。

宫颈粘液中普遍存在。使用这些准则,有生育能力和没有生育能力**的男性的正常参考值的百分率范围都大约在0-30%,

极少超过25%的正常精子(门科费德等几个样品。,2001)。

这种低标准值必然产生低门槛,实际上参考限制和3-5%的正常形态标准被发现在体外受精的研究 (库切等。19xx年),宫内人工授精(迪华特凡等人。20xx年)和活跃的生育中。

生育率(凡德尔莫维等。,2005)。

人类的透明带同样选择了一群形态类似的精子群,

但这种“卵首选”精子显示一个更广泛的形态范围

(刘等人。,1990;加勒特等。,1997)。从父亲取得精液中有运动能力的显示“卵首选”形态的精子同样低于

低(8-25%)

(刘等人。,2003)。

58 第一部分精液分析

2.13.2精液涂片制备

快速的染液一般不能胜任于精子形态分析

因为它们被变性的精液蛋白掩盖。对于形态

分析,一般习惯于让精液涂片在固定和染色之前空气干燥

和染色。然而,这样一个过程导致形态假象,因为空气干燥有关联于:

精液涂片是相关联:

1。精子大小的变化:干燥,固定和染色后的精子会小于

活精子显示的形态(卡茨等人。,19xx年);

2.未成熟的精子头发生胀大(索莱尔托里霍等。,20xx年)和

3失去渗透性敏感细胞质滴(亚伯拉罕- Peskir等。,20xx年;

库珀等人。,2004),虽然细胞质中过剩的大量的胞质被保留了下来。

保留。

应该从新鲜精液中制作两张或更多张涂片,以防应当从新鲜精液样本,以防有万一染液有问题或者一张涂片被损坏。

重复对样本进行评估

最好两张涂片都评估两次,因为做精子形态分析时,涂片之间可能有重要的变化

4.混匀精液样本(见专栏2.3)。

图。 2.10 形态学“正常”的精子

(一,二)体外透明带获得精子,经Shorr染色 (三)Papanicolaoustained

性交后宫颈粘液取得精子精子头部缺陷非常少

中段或者尾部主段已经评估尾部可能弯曲,但是不尖锐成棱形

成角。

(一,二)转载由刘等人。 (2003)由欧洲人类生殖和胚胎学会

(三)从门科费德转载及克鲁格(19xx年由平科特威廉斯&威尔金斯权限)。

b

c的量

第2章 标准程序

? 立即删除一等分,让没有时间解决的精子来

移出悬浮液。

? 不怕精液样本,然后删除复制等分试样。

? 不同的涂抹方法可用于2.11)不同条件下(图。

2.13.2.1正常精液样本

在这个过程 中,精子标本均匀涂抹在玻片表面

动作轻柔(见图。2.11a,2.12)。

1。用无棉纸清洁玻片的表面

纸巾。

2。标签与标识信息(如识别部分霜花

编号,日期)使用中等硬铅(HB或第2号)铅笔。

3。用5-10微升的精液标本,精子的浓度取决于向

年底的幻灯片。使用第二个幻灯片拉动精液沿面下降

幻灯片的(图2.11a,2.12)。如果拖动幻灯片非磨砂,边缘的

两端可用于制造4种不同涂片的幻灯片。

4。允许幻灯片干燥空气和染色他们为2.14节所述。

注1: 铅笔铅染色固定剂和稳定,而油墨和一些永久

标记是不是。

NOTE2,推片前,不要让精液小滴停留在玻片边缘超过两秒钟

一秒钟之前涂抹夫妇。

图。 2.11 精液精子形态的涂抹方法

(一)“羽”的稀释精液的方法。下降的精液(第)利差沿后缘

幻灯片的角度和拉在幻灯片的形式转发到污迹。 (二)移液器方法

洗涤样品。阿的精子悬液(SS)的下降,分布在玻片表面的

推进横向移液器(P)的。

S

P

SS

>>> a <

60第一部分精液分析

note3.要让玻片的光滑面进行涂片,把精液小滴拉过玻片,不要推。

涂片的质量(玻片上精子最少重叠)取决于

于:

1.精液量和精子浓度:精子越少,

他们就越不可能是相互重叠;

2.拖拉的角度(霍奇基斯1945):角度越小,涂片越薄

y 的:速度抹黑(埃利亚松1971)更快速的运动,

较厚的污迹。

开始了 第二 卷10μ升 ,1个 1角 约 45 ° 和诋毁。这些方程通常可以由计算机求解。 然后,可以更改参数,如有必要,以减少重叠的精子

幻灯片(门科费德等。,1990)。羽化效果很好时精液粘度

低,但往往是极不合适的精液粘稠(见图。2.12和第

2.13.2.3)。

图。 2.12 准备一个正常的精液涂片

要获得这项议案的感觉,放置在一个45度角的移动拖动幻灯片和它接触

与 小组 等分( 左精液),其中 ) 沿 面板 边缘运行的幻灯片( 中 。使

慢慢地滑回拖(超过约1秒)沿长度的幻灯片产生

涂片( 右图 )。

照片提供的C巴西。

精子浓度低(<2 × 10 6 /毫升),粘性或碎片载货样本,或

当电脑辅助形态办(见第3.5.4),不同

办法可能是必要的。

2.13.2.2低精子浓度样品

如果精子浓度较低(如<2 × 10 6 /毫升),集中

取樣

1。1.600克离心10分钟

2。除去大多数上清液。

第二章 标准程序

3。轻轻敲打试管,混匀底部剩余物

4。获取可能的精子浓度,最高不超过约

50 × 10 6 /毫升。

5。当作一个正常的样本(见第 2.13.2.1)。

注: 离心可能影响精子形态,其使用必须记录。

2.13.2粘性精液样本

有时很难做好一张好的涂片,因为精浆是

高粘稠,在造成涂片厚薄不均的。粘稠的样本可以

以同样的方式比如没有比液的重或者洗涤处理样本(见第2.3.1.1),或 洗涤(见第2.13.2.4)。

注意: 这些程序可能会影响精子的形态,其使用必须 记录

2.13.2.4洗涤碎片拉丹或粘性精液样本,以减少背景

计算机辅助精子形态的评估

碎片和大量的微粒状物质(如粘稠样本)

可能会导致精子头在边缘上,使他们难以

分类。这些样品应该洗涤,内容如下。

1。稀释一份精液标本(0.2-0.5毫升,根据精子浓度)的

至10毫升,用干净的生理盐水(氯化钠0.9每100毫升纯净(氯化钠) 水)在室温下。

2。800克离心10分钟

3。倒掉大部分上清液

4。轻轻混匀余液

5。吸取5-10微升精子混悬液,制成涂片

6。于400倍的镜头下浏览玻片,以确定涂片是否均匀 涂片均匀扩散。

7。于高倍镜下检查最少40个精子每个视野,没有凝集或者重叠

8。使涂片在空气干燥,染色。

第一部分精液分析

如果有太多重叠的精子,再作一张更少是精子的涂片

如果精子过于稀少,再制一张有更多精标本的涂片

注3: 洗涤可能影响精子的形态和过程必须

被记录下来。

{1留下精液液化时间超过30分钟,然后才

可降低背景的涂片染色。

2.14 染色方法

一旦精液涂片已风干,就应该固定,染色,

作者:巴氏使用,Shorr或Diff -

奎克染色推荐。

于明亮视野观察,三种染液染色后标本精子头部顶体区染成淡兰色,顶体后区染深蓝色

在中段可能会显示一些红色,尾部染成兰色或者微红色。

多余的胞浆小滴,常常位于头部后面,围绕着中段,被 染成粉红色或者红色

或红色(巴氏染色)或红橙色(Shorr染色)。

评论:一滴精液加于已经存在固定剂和染液的玻片上的快速染色方法,已经有商品。这些方法是不被推荐的,

但是,因为没有均匀分布的精子,

由涂抹技术,它是不可能遵守必要的细节

这里所描述的形态分类。

2.14.1传统的固定和连续染色

这涉及到以下步骤:

? 乙醇固定的细胞,它也脱水他们;

? 梯度乙醇补湿固定涂片逐步允许

水溶性苏木染色;

? 纯净水补湿干涂片允许水溶性

苏木素染色;

? 苏木到细胞核染色蓝色;

? 自来水删除未绑定的核苏木;

? 酸性乙醇消除特异结合染料从非

细胞质(脱色);

? 自来水酸度降低,回到蓝色的

核;

第二章 标准程序

? 斯科特的解决方案返回蓝色的核(如自来水

不足);

? 乙醇脱水涂片允许乙醇可溶性

奥兰治克/电子艺界- 50染色;

? 橙染色的细胞质的G粉红色;

? 电子艺界- 50染色的细胞质粉红色;

? 梯度乙醇脱水染色涂片逐步允许

乙醇的水溶性mountants使用;

? 二甲苯允许mountants使用乙醇不溶

(见专栏2.14)。

幻灯片可以查看卸载或安装一个没有或盖玻片附()。

安装许可证的幻灯片长期贮存,使他们可以重新评估

必要的,在内部质量控制程序中使用。折光指数(RI)

of mountants干燥后(1.50至1.55)相似,玻璃制品(1.50至1.58)和

最好的光学质量配备了一个类似的浸泡油与国际扶轮(1.52)的使用。

2.14.2巴氏染色过程对精子形态

在巴氏染色提供良好的精子和其他细胞染色。这

污渍的头部,过量的顶体和后顶体区域的残余

细胞质中,中段和主要作品。修改后的染色技术

这里描述的证明有用的精子形态和分析

未成熟生殖细胞和非精子细胞检查(见板1-14)。例行

程序已被修改工作,而不会醚(作为固定剂)或二甲苯

(用于安装)(ESHRE /南洋美专,20xx年)(见第2.14.2 .4)。染色用幻灯片 巴氏程序的安装,可永久保存,并为今后的

使用内部质量控制程序。如果在黑暗中存储的,应当

稳定数月或数年。

下面的方法是用来准备在本手册中板,从幻灯片

这是安装在一乙醇不溶mountant。

2.14.2.1试剂

1。巴氏染色成分:市售或见附件4,

第A4.10。

2。酸性乙醇:加浓盐酸1.0毫升至200毫升

70%(5 / v)的乙醇。

3。二甲苯:乙醇,1 +1(1:2); 100%乙醇和二甲苯的混合等部分。

注1: 二甲苯是一种健康的危害,应该用在橱柜油烟。

注2: 涂片应空气干燥时,至少4,但可以存储的最多

一周前,固定和染色。

64 第一部分精液分析

2.14.2.2固定风干精液涂片

1。95%(5 / 5)至少15分钟,乙醇浸泡幻灯片。

2.14.2.3精液涂片染色固定

沉浸在幻灯片的顺序:

1。乙醇80%(5 / 5)30秒

2。乙醇50%(5 / 5)30秒

3。纯净水30秒

4。哈里斯的苏木4分钟

5。纯净水30秒

6。酸性乙醇逢低* 4-8

7。冷自来水运行5分钟

8。乙醇50%(5 / 5)30秒

9。乙醇80%(5 / 5)30秒

10。乙醇95%(5 / 5)至少15分钟

11。G - 6级橙染色1分钟

12。乙醇95%(5 / 5)30秒

13.乙醇95%(5 / 5)30秒

14。乙醇95%(5 / 5)30秒

15。电子艺界- 50绿染色1分钟

16.乙醇95%(5 / 5)30秒

17。乙醇95%(5 / 5)30秒

18。乙醇100%15秒

19。乙醇100%15秒

一浸*对应约1秒浸泡。

注1: 乙醇固定使细胞脱水的。因此,采取涂片

直接从95%乙醇固定染色步骤,可能只需要10秒

80%的乙醇,而涂片有空气干燥后,必须保持固定

长(2-3分钟)在50%乙醇。

注2: 在第6步,开始逢低4,继续,直到结果令人满意。这是一 关键步骤作为脱色时间,大大改变了最后的染色强度。

如果此步骤省略,精子和背景将是黑暗的。增加

人数的骤降将使精子和背景暗淡。

注3: 幻灯片可以查看卸载或安装。

2标准程序第 65 章

2.14.2.4处理的精液涂片染色前安装

有两种用于安装准备液:乙醇,溶于

乙醇不溶mountants。

? 使用乙醇可溶性安装媒体上直接涂片仍乙醇湿润的。

y 为乙醇不溶安装媒体,采取直接从步骤19片以上

通过以下步骤(所要履行的一个烟柜):

1。二甲苯:乙醇,1 +1(1:2)1分钟

2。二甲苯100%1分钟。

在删除一个幻灯片从染色容器二甲苯时间,让它流失

仅1-2秒,由于幻灯片应该有相当的二甲苯时,安装湿。

2.14.2.5安装精液涂片染色

1。安装中添加2或3小滴的幻灯片。

2。放置一盖玻片(24 毫米× 50毫米或24毫米× 60毫米大小的最方便) 直接涂抹。

3。位置,使盖玻片与介质接触开始从安装

一长边,以防止气泡被捕获。

4。如有必要,按本盖玻片顶部轻轻,帮助推动气泡

幻灯片的边缘。

5。擦去多余二甲苯(如果使用)从下面的幻灯片。

6。允许安装在一抹黑干燥干燥机架或幻灯片水平

保水剂纸24小时在通风橱。

2.14.3 Shorr精子形态学染色程序

该Shorr染色提供了正常的巴氏形式类似的百分比

染色(梅舍德等。,1993)。

2.14.3.1试剂

1。哈里斯苏木:巴氏1号。

2。Shorr解决方案:购买现成的或准备如下。解散 4克的Shorr

在温暖的粉220 50%(5 /视频毫升)乙醇。允许冷却,加2.0毫升的冰川 乙酸(在烟橱)和过滤器。

3。醋酸乙醇:添加冰醋酸25毫升95%到75(5 /视频毫升)乙醇。

4。氨乙醇:25%加5(5 /视频毫升)氢氧化铵至95毫升

75%(5 / v)的乙醇。

2.14.3.2固定风干精液涂片

在醋酸乙醇或75%(5 / v)的乙醇浸泡幻灯片1小时。

66 第一部分精液分析

2.14.3.3精液涂片染色固定

沉浸在幻灯片的顺序:

1。水龙头水12-15逢低*

2。苏木1-2分钟

3。水龙头水12-15逢低

4。氨醇10逢低*

5。水龙头水12-15逢低*

6。乙醇50%(5 / 5)5分钟

7。Shorr染色3-5分钟

8。乙醇50%(5 / 5)5分钟

9。乙醇75%(5 / 5)5分钟

10。乙醇95%(5 / 5)5分钟

一浸*对应约1秒浸泡。

注: 幻灯片可以查看卸载或安装。

2.14.3.4安装精液涂片染色

见第2.14.2.4和2.14.2.5。

2.14.4快速精子形态学染色程序

快速染色方法是特别为那些需要帮助的临床实验室

在分析当天提供的结果。几种鉴别染色套可用

(克鲁格等人。,1987)。一些涂片染色,具有较高的快速程序

背景染色,可能是低于那些巴氏染色质量

污点。

2.14.4.1试剂

1。差异,奎克快速染色试剂盒包括:

1)固色剂试剂(三芳基甲烷染料在甲醇中溶解);

二)染色溶液1(嗜酸性呫吨);

三)染色溶液2(嗜碱性噻嗪)。

2。固定剂:1.8毫克的95%在1000(五/视频毫升溶解三芳基甲烷),甲醇, 选项

3。固定液:甲醇95%(5 / 5),可选。

第2章 67条 的标准程序

2.14.4.2固定风干精液涂片

在三芳基甲烷固定剂(如差分-奎克套件或提供沉浸幻灯片

准备同上)为15秒或95%的甲醇仅1小时。沥干

过剩的解决方案上垂直放置吸水纸幻灯片。

2.14.4.3精液涂片染色固定

沉浸在幻灯片的顺序:

1。快速染色方案一10秒

2。快速染色溶液2 5秒

3。自来水运行10至15倍,以消除多余的污点

排水管在每个幻灯片上放置吸水垂直一步过剩的解决方案

paper

注1: 幻灯片可以查看卸载或安装。

注2: 如果有高背景染色,一等分的精液样本应

清洗(见第2.13.2 0.4)和新幻灯片准备和染色。洗涤

可能影响精子的形态和它的使用必须记录。

2.14.4.4安装精液涂片染色

见第2.14.2.4和2.14.2.5。

2.15染色检查准备

随着染色制剂,1 × 100油浸泡明亮场的目标,至少

1 × 10目镜应该使用。更清晰的图像时,得到类似的液体

折光指数(RI)的细胞(约1.5)和玻璃(1.50-1.58者)

是放置在镜头和卸载部分或玻璃盖玻片。这是

通常浸泡油(国际扶轮1.52)。安装媒体有类似的折射率

(1.50到1.55:见专栏2.14)。

2.15. 正常精子形态分类

精子形态学评估涉及到诸多困难,

缺乏客观性,解释的多样性,和缺少室外质量控制评估

(见第7.13.2)。这里推荐的方法

是一个简单的正常/异常的分类,通过可选的异常精子的形态记录,

下面的标准应适用

于对精子形态学的评估(克鲁格等人形态正常。,

19xx年;门科费德等。,1990;库切等。,1998)。该参考值的限值(第

只是在有效的使用以下描述的技术方法时才有效的。

第一部分精液分析

精子由头部,颈部,中段(中段),主段和尾段组成。因为尾段在光学显微镜下面很难看见,

精子可以认为包括头部(和颈部)和尾部(中段和主段)

件)。对于精子被认为是正常的,它的头部和尾部都必须

是正常的。所有的边缘形态应被视为不正常的。

? 头部应光滑,轮廓规则和外形一般是椭圆形。

应该有一个明确的顶体区域,占头部面积的40-70%

(门科费德等。,2001)。顶体区域应该不包含有大的空泡

以及不超过两个小空泡,空泡不应占有

超过精子头部20%。顶体后区不应含有任何空泡。

?中段应细,规则和大约与精子头部长度相等。

中段的主轴必须与头部的主轴对齐

残余的细胞质如果过量,超过精子头部的1/3时就被认为是异常。

(莫蒂默与门科费德,2001)。

尾部的长度应该有一个统一的标准,比中段细,大约45微米长(大约精子长度的十倍)

长度:它有可能会环回本身,条件是没有尖锐的角度显示鞭毛破坏。(见图2.10) 锐角的鞭毛突破指标。

评论1:在这个技术方法下,精子头部的形状比它的大小更重要,

除非这些大小都是极不正常的。

评论2目镜测微计可能有助于区分正常和异常精子头部大小的精子

评论3:染精子头部尺寸的77巴氏

(在第2.14.2由于染色程序和分类为正常的

这里给出的标准),由电脑系统测量(变异系数测定

2-7%)有以下尺寸:平均长

4.1μ米,95%CI为3.7-4.7;平均宽度2.8μ米,95%CI为2.5-3.2,平均头宽比 比1.5,95%CI为13-18。

评论4:中段 74巴氏染色的精子(染色

在第2.14.2给予正常的程序和划分的标准

这里给出)和由同一电脑系统测量了以下

尺寸:平均长4.0μ微米,95%CI为3.3-5.2;平均宽度0.6μ米,95%信赖区间

0.5-0.7。

评论5: 卷曲的尾巴(> 360 °,见图。2.13米)可能表明附睾功能障碍

(佩尔弗里等。,1982)。

这种对正常精子形态的评估应用最好是通过学习

认知全部的精子在形态上的细微变化(正常/边界精子头和尾部

见1-12及其评注)。

第2章 标准程序

2.15.2异常精子形态的分类

人类精液样本含有不同种类畸形的精子。

精子生成缺陷和一些附睾的病理疾病通常导致异常形态精子百分率的增加,(李等人。,19xx年), 该

形态缺陷通常是混合的异常精子通常导致生育的可能性更低

依靠异常精子的不同类型,可能也有不正常的DNA

精子形态缺陷与过量的DNA碎片(甘迪尼等人。,20xx年),,染色体结构异常的发生率增多,不成熟核色质和异倍体。(德维拉尔等。,20xx年;马丁等人。,2003)。

非整倍体因此,应重点强调精子头形态的重要性,虽然精子尾也要考虑到。

以下类别的缺陷,应注意到(见图。2.13)。

? 头部缺陷:大或小,锥形,梨形,圆形,无定形,空泡化

(> 2个空泡或> 20%头部被无染色的空泡占据),

空泡在顶体后区,小或大顶体面积

小于40%或> 70%的头部区域),双头,或这些的组合。

? 颈部和中段缺陷:中段非对称插入头部

太厚或不规则形,尖锐弯曲,异常变细,或其中的任何组合

? 主段的缺陷:短,多样的,破碎,发卡型弯曲,尖角样弯曲,不规则宽,卷圈,或者任何组合。

? 过量剩余细胞质(ERC):这是从有缺陷的精子生成过程产生的异常精子。

精子特征表示由大量不规则的细胞质染色,超过头部的三分之一或更多大小 常常与有缺陷的中段一起,是异常形态(莫蒂默及相关缺陷midpieces

门科费德,20xx年)是不正常。这种不正常的过多的细胞质,不应

称为胞质小滴(库珀,2005)。

评论1: 细胞质液滴(在头颈交接处膜结合小囊泡)

是正常的生理功能的人类精子的一部分

如果肿胀,他们会延长中段延伸,用相差显微镜观察,

差分干涉对比度和X射线显微镜

精液中的活细胞,宫颈粘液和介质中(亚伯拉罕- Peskir等。,20xx年;

Fetic等。,2006)。

评论2: 细胞质滴液具有敏感的渗透性,不容易在常规的空气干燥程序中保存 (库珀等人。,20xx年;钱特勒与亚伯拉罕,

Peskir,20xx年)。他们在染色后不明显,他们可能会表现为

中段小的膨胀。细胞质液滴在染色后不到精子头部的三分之一,并不认为是异常的。 在精子头部的大小在固定和染色制剂(莫蒂默与门科费德,

20xx年),并没有考虑异常。

70 第一部分精液分析

2.16形态学样本

在1-14样本的显微图片,已经严格的应用了上文提出的严格的形态学标准进行评估

精子形态分析是主观的,尤其是难以标准化,因为它企图

画一个正常和不正常细胞之间的人工的分界点,

此项分析基于大量的精子头部和尾部的形态特征分析

样本由一个专家评估得出,博士Thinus克鲁格。这些评估已

已经添加了附加的意见,以确定所有异常形态精子的统一

相对每种颜色样本图是一个表描述形态的评估

该表显示精子头部形状是正常还是不正常,

提供了详细的除了头部外形上的资料

指示是否中段和尾部是否形态正常,以及这个精子是否全部正常

其他有关评论在“comments"下面

该评论在表格2.6中有进一步解释

图。 2.13 原理图纸人类精子的一些不正常的形式

改编自克鲁格等人。,19xx年通过MQ的医疗许可转载。

世卫组织98039

答:总的缺陷

(一)

(b)

梨状

(d)

非晶态

(e)

空泡化

(f)

area

(g)

弯曲

颈部 顶体

二颈部和中段缺陷

(h)

非对称

(一)

插入

(j)

(k)

三尾缺陷

(l)

弯曲

(m)

(n)

> 1/3rd头

四超额剩余

细胞质

(c)

顶体

第2章 第71 的标准程序

表2.6 说明用于评论的形态板

<40%的ACR不到40%的精子头部顶体占领了 > 70%的ACR超过70%的精子头部顶体占领了

>三分之一异常细胞质(超过三分之一的头规模的三分之一)(ERC)的

<三分之一正常胞质(不到三分之一的头规模的三分之一)(光盘版) 异常言自明

非晶头部形状(见图。2.13d)

杆菌的细菌

弯曲角度不自然地急剧

盘绕言自明

胞浆小滴的CD

细胞质或超额剩余细胞质或细胞质小滴,

根据大小

变质白细胞言自明

精细胞退化言自明

缺陷不言自明

双自明

上皮细胞由男性管道系统

对外关系与合作过量残余细胞质

平底的椭圆形精子头不

重点失焦(未评估)

如果不是所有的聚丙烯行的主要部分是出现在显微镜(但如果它是 正常的精子将被视为正常)

插入尾部插入的站点是一个头的长轴方

irreg不规则轮廓

环尾执意回到自己

巨噬细胞吞噬白细胞

单核细胞无颗粒白细胞

精子细胞未成熟生殖细胞

没有缺席雅顶体

正常子宫颈粘液中发现类似的

不是因为评估重叠或贫穷的焦点

头尾部重叠所掩盖

巴勒斯坦权力机构VAC的液泡在后顶体区域

针头不是一个精子:目前没有染色质

中性粒细胞变形

梨状头形状(见图。2.13b)

圆头形状(见图。2.13c)

侧视图精子看到边缘上

小头的大小

精子细胞未成熟生殖细胞

精母细胞未成熟生殖细胞

锥形头部形状(见图。2.13a)

粗言自明

太长不言自明

VAC的液泡

> 2伏交流电超过2液泡

72 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

板1

10微米

第2章 73条 的标准程序 评估精子形态板1

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常正常正常,如果聚丙烯行 2,如果正常正常正常聚丙烯行 3,如果正常正常正常聚丙烯行 4,如果正常正常正常聚丙烯行 5例正常正常正常,如果聚丙烯行 6例正常正常正常,如果聚丙烯行 7例正常正常正常,如果聚丙烯行 8例正常正常正常,如果聚丙烯行 9例正常正常正常,如果聚丙烯行 10正常正常正常,如果聚丙烯行 11例正常正常正常,如果聚丙烯行 12例正常正常正常,如果聚丙烯行 13例正常正常正常,如果聚丙烯行 14例正常正常正常,如果聚丙烯行 15例正常正常正常,如果聚丙烯行 16名正常正常正常,如果聚丙烯行 17例正常正常正常,如果聚丙烯行 18例正常正常正常,如果聚丙烯行 19例正常正常正常,如果聚丙烯行 20例正常正常正常,如果聚丙烯行 74 第一部分精液分析 显微镜提供的C巴西。

板2 10微米

第二章的标准程序 75 评估精子形态板2

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一异常厚一倍异常

2异常irreg异常侧视图

三梨状异常弯曲,irreg,

对外关系与合作异常>三分之一

4异常异常

5不正常梨形异常

6异常异常

7异常异常

8异常厚异常

9异常插入异常

10异常异常

11异常异常

12异常梨状弯曲异常

13异常> 2伏交流电,功率放大器

VAC的异常

14厚异常异常

15异常梨状厚,对外关系与合作异常>三分之一 16对外关系与合作异常梨形异常>三分之一 17例正常扩音VAC的异常

18厚异常,插入异常

19异常异常异常

20厚异常异常

21厚异常异常

22异常异常

23异常异常

24例正常> 2 VAC的厚异常

25异常厚,弯曲异常

26厚异常异常

27异常> 70%的ACR厚异常

28厚异常异常

29异常厚异常

30厚异常异常

31异常梨状厚异常

32小厚异常异常

33小厚异常异常

34对外关系与合作异常异常>三分之一 35厚异常异常

36厚异常异常

76 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

板3 10微米

第2章 77条 的标准程序

评估精子形态板3

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一异常锥形厚异常

2异常异常

3异常irreg异常

4轮异常异常

5轮异常异常

6圆锥异常异常

7锥形异常异常

非晶厚8异常异常

9轮厚异常异常

10锥形irreg异常,异常厚

两个单元11

12异常> 2伏交流电,宾夕法尼亚VAC的异常 13异常异常

14例正常扩音VAC的异常

15个针头

16小异常异常

17大异常异常

18例正常厚异常

19厚异常异常

20异常> 2 VAC的插入异常

21名正常> 70%的ACR异常 22异常> 70%的ACR异常 23异常<40%的ACR,小异常 24异常<40%的ACR。小异常 25异常<40%的ACR,小异常 26异常> 70%的ACR异常 27异常<ACR的40%,> 2 VAC的irreg异常

28例正常> 2 VAC的异常 29异常锥形异常

30锥形异常异常

31锥形异常异常

32例正常厚异常

33正常厚异常

34异常<40%的ACR厚异常 35异常厚,弯曲异常 36个针头

78 第一部分精液分析 显微镜提供的C巴西。 板4

10微米

第2章 79条 的标准程序 评估精子形态板4 精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一平厚异常异常

2正常厚,弯曲异常 3正常厚异常

第四正常厚,弯曲异常 5例正常厚异常

6例正常厚异常

7异常irreg异常

8例正常厚异常

9例正常插入,弯曲异常

10例正常厚,弯曲异常

11 VAC的异常异常功率放大器

12异常异常

13异常<40%的ACR,> 2伏交流电。厚异常 14例正常irreg异常

15例正常插入异常

16名正常厚异常

17例正常插入,厚异常

18例正常厚,太长异常

19例正常<40%的ACR插入异常 20例正常<40%不正常的ACR irreg 80 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

10微米 板5

第2章 第81 的标准程序

评估精子形态板5

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一异常紧急救济协调员异常>三分之一 2正常弯曲正常不正常

3异常> 70%的ACR环异常

4正常弯曲正常不正常

厚环5例正常不正常

6宾夕法尼亚VAC的异常盘绕异常 7例正常正常

8例正常双重异常

9异常盘绕异常

10弯曲异常,插入异常盘绕

11例正常厚弯曲异常

12例正常弯曲正常不正常

82 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

10微米 板6

第2章 83条 的标准程序 评估精子形态板6

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常<40%的ACR厚正常不正常 2正常厚异常

3正常正常

四厚异常异常

5异常锥形异常

6不能分类异常

精子

7异常厚盘绕异常

8上皮细胞

9例正常厚,插入异常

10异常<40%的ACR厚异常 11例正常厚异常

12变质

巨噬细胞?

13多形体

14梨形异常异常

15例正常正常

16异常<40%的ACR异常

17轮没有看到异常异常自由的头? 18厚异常异常

19例正常正常

20例正常如果聚丙烯行 21异常菲亚特异常

22杆菌

23例正常厚异常

24例正常厚盘绕异常

25非晶异常异常

26精细胞

27多形体

84 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

10微米 板7

第二章的标准程序 85

评估精子形态板7

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常2 VAC的正常

二正常正常

3正常厚异常

4正常正常

5例正常,如果正常聚丙烯行 6例正常厚异常

7例正常VAC的表面正常

8普通的CD正常<三分之一

9异常厚,对外关系与合作异常>三分之一 10正常正常

11 VAC的正常循环异常功率放大器 12例正常,如果正常聚丙烯行 13 VAC的正常扩音异常

14例正常扩音VAC的异常

15异常<40%的ACR厚异常

16异常<40%的ACR异常

17例正常正常

18例正常,如果正常聚丙烯行 19例正常厚短期异常

20厚异常异常

21名正常> 2 VAC的异常

22轮异常异常

23轮异常异常

24例正常正常

25精子头部

细胞质?

26正常正常

27例正常没有异常雅盘绕 28例正常正常

29轮异常异常

30 VAC的正常扩音异常

31异常锥形,巴勒斯坦权力机构 VAC的异常

32例正常,如果正常聚丙烯行 33正常正常

34正常,如果正常聚丙烯行 35厚异常弯曲异常

36正常,如果正常聚丙烯行 37正常,如果正常聚丙烯行 38轮异常异常

39正常正常

40例正常正常

41正常正常

42正常厚异常

43正常<40%的ACR异常 44焦点不

评估

45轮异常异常

46轮异常异常

47正常正常

48正常,如果 正常 聚丙烯行 86 第一部分精液分析 显微镜提供的C巴西。 板8 10微米

第2章 87条 的标准程序 精子形态学评估中厚板8 精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常正常正常

2正常> 2 VAC的正常不正常

三锥异常异常

4正常正常正常

5例正常正常

6例正常,如果正常聚丙烯行

7例正常正常,如果聚丙烯行

8例正常厚异常

9例正常正常

10正常正常

11例正常扩音VAC的异常

12例正常正常

13异常异常

14例正常,如果正常聚丙烯行

15非晶缺损畸形异常

16名正常,如果正常聚丙烯行

17异常> 70%的ACR厚,对外关系与合作异常>三分之一 18例正常正常

19个针头

20正常正常

21 VAC的正常扩音异常

22异常锥形厚,对外关系与合作异常>三分之一 23平厚异常异常

24例正常> 2 VAC的异常

25轮异常异常

26例正常厚异常

27例正常厚异常

28例正常> 2伏交流电,> 70%

ACR的异常

29异常异常

30例正常> 70%的ACR异常

31梨形异常异常

88 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

片9

10微米

第2章 89条 的标准程序

形态学评估精子片9

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一异常盘绕异常

2不重叠评估

3异常<40%的ACR异常

4,如果正常正常聚丙烯行

5例正常,如果正常聚丙烯行

6例正常> 70%的ACR插入异常 7例正常插入异常

8例正常> 70%的ACR插入异常 9异常扩音VAC的异常

10例正常> 2 VAC的厚异常

11异常厚,对外关系与合作异常>三分之一 12厚异常,插入

对外关系与合作异常>三分之一 13例正常,如果正常聚丙烯行 14厚异常异常

15例正常正常正常

16异常异常

17锥形异常,3伏交流电,

宾夕法尼亚VAC的异常

18例正常正常

19 VAC的异常> 20%异常

20锥形异常异常

21 VAC的正常扩音异常

22非晶异常弯曲异常

23锥形双异常异常

24 VAC的异常异常功率放大器 25例正常> 2 VAC的异常

26正常,如果正常聚丙烯行

27例正常正常

28例正常,如果正常聚丙烯行 29不重叠的评估

30个不重叠的评估

31正常,如果正常聚丙烯行

32例正常,如果正常聚丙烯行 33正常,如果正常聚丙烯行

34正常厚厚,卷曲异常

35 1侧不正常的椭圆形异常

36例正常<40%的ACR异常

37个不重叠的评估

90 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

板10

10微米

第2章 第91 的标准程序

评估精子形态板10

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常插入异常

2正常,如果正常聚丙烯行

三梨状异常异常

4正常正常

5例正常厚异常

6梨状异常紧急救济协调员弯曲异常>三分之一 7例正常正常

8例正常正常

3伏交流电异常9例正常

10异常锥形厚,对外关系与合作异常>三分之一 11异常锥形,

<40%的ACR弯曲异常

12单核细胞

13多形体

14多形体

15单核细胞

16锥形异常异常

17例正常,如果正常聚丙烯行

18例正常正常

19例正常正常

20例正常,如果聚丙烯行

21非晶异常异常

22例正常,如果正常聚丙烯行

23锥形厚弯曲异常异常

24个不重叠的评估

25锥形异常异常

26异常非晶厚,对外关系与合作异常>三分之一 27例正常厚异常

28异常非晶厚异常

29 VAC的异常异常功率放大器

30厚异常异常

31厚异常盘绕异常

32例正常厚异常

33个不重叠的评估

34个不重叠的评估

35异常amorph,

没有异常雅厚

36例正常<40%的ACR异常

37双厚异常梨形异常

38例正常,如果正常聚丙烯行

39正常厚异常

40异常<40%的ACR异常

41厚异常弯曲异常

42正常,如果正常聚丙烯行

43正常2伏交流电,

<40%的ACR异常

44正常正常

45异常厚,ECR的异常>三分之一

46厚异常异常

92 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

10微米 片11

第2章 93条 的标准程序

形态学评估精子片11

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

一异常插入异常

2异常插入异常

三正常不正常的厚环

4正常正常

5异常> 2伏交流电,<40%的ACR厚异常 6例正常循环异常

7异常插入异常

8例正常循环异常

9异常> 70%的ACR,锥度异常

10锥形异常异常

11例正常厚异常

12锥形异常异常

13例正常<40%的ACR厚异常

14异常锥形厚,对外关系与合作异常>三分之一 15异常锥形厚异常

16锥形异常异常

17异常非晶厚异常

18例正常正常

19例正常不正常

20异常异常

21异常异常

22例正常> 70%的ACR环异常

23正常正常

24例正常正常

25多形体

26正常正常

27例正常正常

28例正常> 70%的ACR异常

29单核细胞

30多形体

31单核细胞

32多形体

33单核细胞

94 第一部分精液分析

显微镜提供的C巴西。

板12 10微米

第二章的标准程序 95

评估精子形态板12

精子

形状

其它头

评论{/

中段

评论{/

委托人

评论{/

总体精子

分类

评论

1正常> 70%的ACR异常 2异常异常

3异常> 70%的ACR异常 4例正常,如果正常聚丙烯行 5厚异常异常

6圆锥异常异常

七不厚没有评估的重点 8异常厚,弯曲异常 9退化

白细胞

10厚异常异常

连续11轮异常异常 12例正常正常

13异常锥形弯曲异常 14异常插入异常

15多形体

16非晶异常异常

17异常盘绕异常

18厚异常盘绕异常 19例正常双重异常 20厚异常异常

21个不重叠的评估 22梨形异常异常

23正常正常

24异常异常针头

25非晶异常弯曲异常 26异常非晶厚,弯曲异常 27例正常厚异常

28例正常,如果正常聚丙烯行 29异常锥形异常

30轮异常异常

31不正常的弯曲重叠评估 32例正常厚,弯曲异常 33异常异常

34异常异常

35正常弯曲异常

36多形体

37多形体

38多形体

96 第一部分精液分析 显微镜提供的C巴西。 板13

15微米

第二章的标准程序 97 评价的细胞板13

单元格类型

1巨噬细胞

2精子异常

3细胞质

精子异常4

5精母细胞

6精子异常

7异常精子?松散的脑袋细胞质? 8细胞质

9精子细胞分化

10精母细胞

11精细胞退化

12个精子细胞

13精细胞退化

14分精母细胞

15细胞质

16精细胞退化

17分精母细胞

18异常精子

19细胞质

20异常精子

21精细胞

巨噬细胞吞噬22

23精母细胞

24细胞质

98 第一部分精液分析 显微镜提供的C巴西。 15微米 板14

第二章的标准程序 99 评价的细胞板14

单元格类型

1巨噬细胞

2精子异常

3(分)精子细胞

4(分)精子细胞

5细胞质

不能分类6

7精子细胞退化

8精细胞退化?

9精细胞退化

10精细胞退化

11巨噬细胞

12精细胞退化

13精细胞退化

14精细胞退化

15精细胞退化

16巨噬细胞

2.17涂片分析精子形态

2.17.1评估精子形态正常

这可能足以确定了正常精子的比例。有了这个 形态学评估模式,对精子的功能区

得到考虑。这是不必要的区分所有的头部大小和变化 各种形状或主段和中段缺陷。

形态评价应当对每一个课税精子

在一些系统选定了滑坡区,以防止偏颇的选择 特别精子。

? 检查幻灯片使用石油布赖特在光学放大倍率× 1000 浸泡。

? 评估各领域的所有精子,从一个领域转移到微观 另一個

? 评估,以达到至少200名精子在每个复制,在 可接受的低采样错误(见专栏2.5)。

? 塔利异常精子数正常,与实验室的援助 计数器。

? 重复精子评估至少200名,最好是复制 幻灯片,但在相同的幻灯片交替。

100 第一部分精液分析

? 形态形成了比较正常的比例由两个独立 评估。

? 计算的平均差额比例和形式的正常的2 从复制评估。

? 确定的可接受的图从表2.1或差异。 A7.2, 附录7。(每个显示之间的两个最大差值百分比

,预计将在95%的样本的抽样误差发生的原因只)。 ? 如果百分比差异是可以接受的,报告中的平均 正常形态百分率。如果差距过大,重复评估 在同一幻灯片(见专栏2.6)。

? 报告的正常形式的平均百分比为最接近的整数。 注1: 评估唯一完整精子,尾部定义为1头,1(见 第2.7.3),因为只有完整的精子是精子浓度计算。

别指望未成熟胚(轮)的细胞。

注2: 不要重复评估和那些对精子的头部躺在

边缘;这些不能充分加以分析。他们不应该存在于一个良好的

涂片(见第2.13.2.1),但可能会出现碎片和大量的

颗粒物质存在,例如在粘性精液:见第2.13.2.3()。

这些标本进行清洗(见第2.13.2.4)和幻灯片审查

前染色。

2.17.2样例

范例1.在复制与形态正常精子的百分比

200精子计数是18和9。圆形,平均为14%,而

分别为9%。从表2.1可以看出,为14%,平均区别

高达7%的预期仅偶然发生。由于观察

超过这一差异,结果被丢弃,幻灯片重新评估

复制。

实施例2:在复制与形态正常精子的百分比

200精子计数为10和14。圆形,平均为12%,而

分别是4%。从表2.1可以看出,为12%,平均区别

高达7%的预期仅偶然发生。由于观察

不同的是低于这一标准,结果是接受,平均值报告,

即12%的正常形式。

2.17.3下的参考上限

正常形态下的参考上限为4%(第5百分位数,95%CI为3.0-4.0)。 评论: 总人数的形态正常精子的精液

是生物学意义。这是获得总人数乘以

精子在射精(见2.8.7节)的正常形式的百分比。

第2章 101 的标准程序

2.17.4评估精子形态异常

所有分类精子异常表格可诊断或研究

受益。如果需要,请注意缺陷的性质和计算百分比

与头(%的H缺陷精子),中段(%男)或主要作品

(%p)时,与过量残余细胞质(%?者)。

阿multikey柜台都可以使用,有一个关键的正常,异常之一, 一对四(高,男,磷,C)的每一个异常类。这种计数器允许 每个精子是只计算一次,它的每一个异常被

给分。

? 从400个精子最后评估,有可能获得

正常和不正常的百分比精子(两个数字应该补充

高达100%),以及与每个类型的异常率,即%的H,

%男,%%P和?(这些数字不会增加100%)。

? 精子百分比的类,这些异常是获得

划分了具体的缺陷由异常精子总数

正常和不正常的精子总数得分× 100。这些方程通常可以由计算机求解。 也可以用数字来计算指数的多个异常(见

第3.1节)。

2.17.5样例

示例。200精子与一个复制一,42精子6键柜台得分

顷和158分正常不正常。精子异常的158,

有缺陷的140头,102中段有缺陷,有30个主要作品

缺陷,并有44个超额剩余细胞质。从结果复制2的36

正常和不正常的精子164个,其中有122头缺陷,108中段

缺陷,有22片主要缺陷,超额剩余36细胞质。

只有类是比较正常的复制的接受程度。复制一

有21%的正常精子和复制2有18%。这些值的意思是

19.5%(四舍五入至20%),差异3%。从表2.1可以看出,, 为20%,高达8%的差距,预计平均会发生的

仅机会。由于观察到不同的是低于这一标准,结果都接受

和平均值报道:(42 +36)/ 400 = 20%,正常形态异常

头(140 +122)/ 400 = 66%,异常midpieces(102 +108)/ 400 = 53%,异常 主要作品(30 +22)/ 400 = 13%,与过量残余及百分比

cytyoplasm(44 +36)/ 400 = 20%。

注: 这些类别不添加%,因为每个异常高达100吻合

另外,一些精子有多个缺陷。

评论: 一个异常精子更详细的分析,各种指数

结合了异常精子在每名地区的一些异常,

是载于第3.1.1。

102 第一部分精液分析

2.17.6评估具体精子缺陷

有时,许多精子将有一个具体的结构性缺陷。例如,

顶体可能无法发展,从而产生了“小轮头缺陷”

或“globozoospermia”。如果基板没有附加到细胞核对面

在排精的极顶体,元首被吸收,只有尾巴

被发现在精液(即针头缺陷)。

注1:Pinheads( 免费尾巴)不计算为团长的缺陷,因为他们拥有 没有染色质结构前方或头部基底板。

注2: 由于免费尾巴(pinheads)和自由的人,并未如精子计数

(定义为一个头部和尾部,参见2.7.3节),他们不考虑

将精子异常。

男子的精子,所有这些缺陷显示一个通常不育。这样的

个案罕见,但至关重要的是,他们发现和正确的报道。因此

报告具体精子缺陷的存在,例如自由精子头,pinheads

(无尾),校长缺乏顶体。

如果有很多这样的缺陷,其发病率相对精子可

决定。如果 N 是相同数量细胞的数量与缺陷计入

精子领域的400,S是精子浓度(每 10 毫升6),

然后浓度(C)的缺陷(每 10 毫升6)可以计算出从

公式 C 二 S ×(不适用/ 400)。

2.18评价精液中白细胞

白细胞,中性粒细胞为主(中性粒细胞,中性粒细胞),

在大多数人的精液(汤姆林森等人。目前,19xx年;约翰尼松等。, (20xx年)他们有时可以从精子细胞和精母细胞分化

精液涂片染色在与巴氏程序(见第2.14.2)。

分化是根据染色着色差异,核大小

和形状(约翰尼松等。,20xx年)(见板6,10,11,12,13和14)。中性 白细胞形态很容易被混淆与多核

精子细胞,但染色一蓝颜色,对比的是更多的粉红色

的精子细胞(约翰尼松等。,2000)。核的大小可能也有助于查明: 单核细胞的细胞核大小的变化表现出广泛的,从大约7米的 μ 淋巴细胞 超过15 米的巨噬细胞μ。这些大小只有准则,因为

变性和分化影响细胞核的大小。

有量化的白细胞人口在其他几个技巧

精液。作为过氧化物酶阳性粒细胞是白细胞的主要形式

精液中,过氧化物酶活性的例行检测是有用的,初步筛选

技术(沃尔夫,19xx年;约翰尼松等。,20xx年)(见第2.18.1)。 白细胞可以进一步有更多的时间,费时和昂贵的区别

对常见白细胞和精子抗原免疫细胞化学检测

(Homyk等。,1990;埃盖特-克鲁斯等。,1992)(见第3.2节)。

第2章 103 的标准程序

2.18.1细胞过氧化物酶染色用邻甲苯胺

这个测试是快速,价格低廉,是一种有益的初步筛选

粒细胞。

2.18.1.1原理

传统上,是在人类精液白细胞计数程序后,组织化学

标识过氧化物酶,它的特点是粒细胞

(图2.14)。该技术具有相对容易被执行的优势,

但它不会检测:

? 其晶型颗粒活性炭已释放;

? 其他类型的白血球细胞,如巨噬细胞和单核细胞,

不包含过氧化物酶。

测试可以有助于鉴别多核中性粒细胞

精子细胞,即过氧化物酶,免费(约翰尼松等。,2000)。该

法是基于以下纳乌姆与卡多佐(19xx年)。这是一种可用套件

商业化。

2.18.1.2试剂

1。磷酸盐缓冲,67 mmol / L的,pH值6.0:溶解 9.47磷酸氢钠克

(2 HPO工艺钠4)在1000毫升的纯净水钾和9.08克二氢

磷酸盐(以PO 4 的Kh 2)在1000毫升的纯净水。添加一个解决办法 其他(约12毫升的钠溶液 2 HPO工艺 4 至88毫升的 二 婆的Kh 4 溶液) 直至pH为6.0。

2。饱和氯化铵( 氯化铵 )溶液:将250克4氯新罕布什尔州到1000毫升 纯净水。

3。二钠乙二胺四乙酸(EDTA 的 钠 2)148 mmol / L的:解散

50克/升的磷酸盐缓冲液(pH 6.0)在第1步准备。

4。基材:解散 9生理盐水克/升 )2.5毫克 ( 邻甲苯胺在10毫升的0.9%。

5。过氧化氢(H 2 O的2)30%(5 / 5):作为购买。

6。工作解决办法:9毫升 邻甲苯胺基体,加入1毫升的饱和氯铵

解决方案,148毫升浓度1 mmol / L的EDTA的钠 2 日和10μL的30%(5 / 5)2和H 2 O的 混合。 该解决方案可用于最多24小时后准备。

注: 癌症研究机构国际(国际癌症研究机构,19xx年)曾表示

该邻甲苯胺,应被视为出于实际目的,因为如果它提出了一个

对人类致癌的危险。采取适当的预防措施(见附录2)。

2.18.1.3程序

1。混合精液样本井(见 专栏2.3)。

104 第一部分精液分析

2。删除的精液和混合0.1毫升0.9毫升的工作液等分

(1 +9(1:10)稀释)。

3。涡精子暂停10秒,轻轻地在室温孵育温度

20-30分钟。另外,摇一摇不断与管

系统。

4。不怕的精液样本,然后删除一等分,混合与复制

上述工作液。

2.18.1.4评估过氧化物酶阳性细胞数的haemocytometer商会

1。经过20 - 30分钟,再组合的精子悬浮液,并填写每一个侧面

haemocytometer与复制准备之一。

2。存储至少4分钟haemocytometer水平在室温温度

在潮湿室(与水饱和的Petri滤纸盖如

菜),以防止干燥,让细胞定居。

3。检查光学腔与相差在 400 × 200或×

放大倍率。

4。计数至少200过氧化物酶阳性细胞在每个复制,以

实现一个可以接受的低采样错误(见专栏2.7 和表2.2)。过氧化物酶 阳性细胞染色棕色,而过氧化物酶阴性细胞

不染(见图。2.14)。

5。检查一室,以网格网格,并继续计数,直到至少200

过氧化物酶阳性细胞已被观察和一个完整的电网已

检查。计数必须由完整的网格,不要停止在中间

一个网格。

6。记下的电网号码注评定为达到至少200 peroxidasepositive

细相同数量的网格将计算从其他会议厅

该haemocytometer。

7。塔利的同一个实验室的援助数量过氧化物酶阳性细胞和网格

计数器。

8。切换到第二的haemocytometer室和执行复制

对电网的第一个复制相同数量的计数,即使产量

少于200过氧化物酶阳性细胞。

9。计算总和,这两个数字差异过氧化物酶抗体阳性

10。确定从表2.5或图差异的接受程度。 A7.1,

附录7。(每个显示之间的两项最大差异是

预计在95%的样本的抽样误差发生的原因仅仅)。

11。如果差异是可以接受的,计算浓度(见第

2.18.1 .5)。如果差距过大,准备两个新的稀释和重复

复制计数的估计数(见专栏2.10)。

第2章 105 的标准程序

12。报告中的过氧化物酶阳性细胞的平均浓度两个重要

数字。

13.计算过氧化物酶阳性细胞占总数的射精(见评论

在第2.18.1.8)。

图。 2.14 过氧化物酶阳性和阴性细胞的人类精液

阿过氧化物酶阳性粒细胞性(P)(棕色)和过氧化物酶阴性的圆形细胞(N)的。 10米栏规模 μ

显微礼貌的TG库珀

2.18.1.5计算的过氧化物酶阳性细胞的精液浓度

精液浓度过氧化物酶阳性细胞是他们数(N)

除以复制数量占总数(即 n 的研究)的网格

(其中一个网格体积为100荷兰),乘以稀释倍数。

对于1 +9(1:10)稀释,浓度为 C =(不适用 /否 )×(1 / 100)× 10 = nl的细胞,每 (不适用/否 )×(1 / 10)nl的每个细胞。因此,(不适用 / n) 是除以10,以获取浓度 每nl的过氧化物酶阳性细胞,(每 106 毫升细胞)。

当每个haemocytometer室全部9个网格进行评估,总

过氧化物酶阳性细胞数可以按这两个总量

钱伯斯(1.8μL)和乘以稀释倍数(10),获得的浓度

在(μ细胞每毫升细胞每1000升)。

注意: 此过程可用于计算圆细胞浓度时

圆细胞总数计算(过氧化物酶阳性和阴性)用于

N 的计算。

106 第一部分精液分析

2.18.1.6灵敏度方法

如果有少于200过氧化物酶阳性在会议厅内,抽样细胞

误差超过5%。当少于400过氧化物酶阳性细胞被发现

在两院各网格,在报告中的细胞数的抽样误差

计算(见表2.2)。

如果少于25过氧化物酶阳性细胞计数在每一个分庭,

集中将<每毫升277万个细胞,这是定量下限

为20%时,抽样误差改进纽鲍尔室全部9个网格

为评估和1 1 9(1:10)稀释使用(库珀等人。,2006)。报告的

过氧化物酶阳性细胞数观察与评论“细胞太少

准确测定浓度(<277 000/ml)“。

评注: 等分缺乏过氧化物阳性细胞的研究

并不一定意味着他们从没有休息的样本。

2.18.1.7样例

范例1.随着1 +9(1:10)稀释,复制一被发现含有60过氧化物酶,

阳性细胞在9格,而复制2包含90过氧化物酶抗体阳性

细胞在9电网。所 不同 的值的总和(60 +90) 的 为 150和18个网格

(90-60)30。从表2.5普遍认为这是超过预期的差

机会只(24),所以结果被丢弃,新复而作出调整。

实施例2:随着1 +9(1:10)稀释,复制一被发现含有204过氧化物酶,

阳性细胞在5格,而复制2包含198过氧化物酶抗体阳性

细胞在5格。所 不同 的值的总和(204 198) 的 是 402和10个网格

(204-198)为6。从表2.5这都被看作是低于找到

机会只(39),所以接受的价值观。

该样品中过氧化物酶的阳性细胞浓度为1 1 9(1:10)稀释,

是 C =(不适用 /否 )×(1 / 10)或每nl的细胞(一十分之四百零二)/ 10 = 4.02细胞/ nl的,或4.0 × 10 6 细胞

每毫升(以两位有效数字)。

实例3随着1 +9(1:10)稀释,复制一被发现含有144过氧化物酶,

阳性细胞在9电网,而复制2包含162过氧化物酶抗体阳性

细胞在9电网。所 不同 的值的总和(144 162) 的 是 306和18个网格

(162-144)为18岁。从表2.5这都被看作是低于找到

机会只(34),所以接受的价值观。

当所有的9格在每一个被评估室,样品的浓度,

为1 +9(1:10)稀释, 是 C =(不适用/ 1.8)× 10 =细胞每 μ 升(306/1.8)× 10 = 1700细胞 每μL或1.7 × 10 6 细胞的数字,每毫升有两个显着。由于少于400细胞

计数,报告表2.2(给306细胞抽样误差约

6%)。

例4。随着1 +9(1:10)稀释,无过氧化物酶阳性细胞发现

或者复制。由于只有不到25过氧化物酶阳性细胞被发现在所有9个网格,

浓度为<277万个每毫升,报告说,“没有过氧化物酶阳性细胞

主要出现在样品。为准确测定浓度细胞太少

(<277 000/ml)“。

第2章 107 的标准程序

2.18.1.8参考值

目前还没有精液中过氧化物酶阳性细胞参考值范围

生育男性。更多的证据之前,本手册保留价值的共识

1.0 × 10 6 过氧化物酶阳性细胞每毫升作为一个阈值。

评论1: 在射精总阳性细胞数目可能过氧化物

反映了一种炎症条件(沃尔夫19xx年)的严重程度。这是相

乘以数量的过氧化物酶阳性细胞浓度

整个射精。

评论2: 报告期截止男性价值观阳性细胞在肥沃的过氧化物酶,

变化从0.5 × 10 6?1.0 × 10 6 白细胞中性粒细胞从每毫升或1 × 10 6 2 × 10 6

白细胞总数每毫升(沃尔夫,1995)。本手册上的版本已

1 × 10 六毫升占白细胞的白细胞门槛。有些人发现

此值太低(沃尔夫,1995),而有些人则认为它太高(Sharma等人。,

20xx年; Punab等。,20xx年),根据检查的端点(精液质量,试管婴儿

结果,细菌的存在,精子活性氧物种的反应)。

评论3: 射精过多的白细胞数量(白细胞,

pyospermia)可能与感染,精子质量差。

评论4: 白细胞依赖损害精子依赖于总

精液中白细胞数和白细胞数相对于

精子数目。

评论5: 白细胞会损害DNA的完整性和通过精子活力

氧化攻击(见4.1节)。不过,是否白细胞浸润水平

观察到的是破坏性的因素,是不可能从一个依赖推断

精液样本,如原因,时间和解剖位置的渗透,

以及涉及的性质,白细胞以及他们是否是在一

激活状态(汤姆林森等人。,1993;艾特肯&贝克,1995;罗西及艾特肯,1997)。

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